Evaluatie van een APS/TEMED aliquoot deel in het protocol van de gel SDS-PA (3 / 8 stap)

Stap 3: Voorbereidingen (deel B)

1) naast het APS/TEMED mengsel aliquoot, bereiden ook een zuivere APS aliquot (d.w.z. zonder TEMED).
2) na aliquoting, zet u de 2 buizen in ultralow vriezer van-80 graden Celsius.
3) terwijl de aliquots bevriezen, bereiden de 30% SDS-PA gel master mix (Tris buffer, natrium dodecyl sulfaat en 30% acrylamide/bisacrylamide mengsel).
4) wanneer de aliquots zijn bevroren, een APS/TEMED aliquoot en twee APS aliquots uit de vriezer halen en start ontdooien.

Opmerkingen:
* Aangezien de gel SDS-PA vangt stollen wanneer de acrylamide/bisacrylamide eenheden de APS radicale ondervonden (geïnitieerd door TEMED), zijn APS én TEMED meestal de laatste toegevoegd.

Tips:
1) lichaamstemperatuur (holding b.v. de buizen door vingers) zal de bevroren buizen sneller ontdooien.
2) glazen platen met verschillende spacers mogelijk verschillende volumes van de gel oplossing naar dezelfde hoogte opgevuld.
3) voor 1 mm spacer glas platen (Houd tot 5,5 mL volume), is 5 mL voldoende voor het oplossen gel terwijl 1 mL voldoende voor het stapelen van gel is.