Stap 5: Testen toxiciteit (Lab applicaties)
Voorbereiding van de teststoffen
-Hydrofiele: Gewicht van de stof, met een vijzel of een stomacher desintegreren en Verdun in zoutoplossing.
-Hydrofobe: Het gewicht van de stof, met een vijzel of een stomacher, uiteengevallen en Verdun het in organisch oplosmiddel (ethanol). 10 ul van monster in een papier schijf toevoegen. Droge gedurende 24 uur (of in een oven) te verwijderen van ethanol.
Remming van de Bioluminescentie door remming van respiratoire keten.
-Het aanpassen van de concentratie van een cultuur van Vibrio fischeri met een geschatte concentratie van 108 cfu / mL (overeenkomend met ongeveer 0,5 McFarland troebelheid).
-Aanplant Vibrio fischeri in een zoutoplossing plaat van TSA (2% NaCl) met een doekje of een spatel Digralsky.
-De plaat bij 22 ° C gedurende 24 uur incuberen.
-Zodra de bacteriën gekweekt, gestort op de plaat 10 ul van de teststof aan de gewenste concentratie. Wacht 15 minuten totdat de daling droogt.
-Observeer de afname van de bioluminescentie in het gebied getroffen door de daling van de teststof onder voorwaarden van de duisternis.
