How to Grow gewone oesterzwam Spawn (Low Tech) (7 / 9 stap)

Stap 7: Inoculatie II (Agar weefselkweek Transfer)

Een andere methode om te enten uw graan, is door eerst het teeltmateriaal van de paddenstoel weefsel op Agar (of klonen). Afmeten van 5.75 gram nutriëntagar poeder aan 1 kop van schoon water (voldoende voor 5 of meer petrischalen). Beginnen te verwarmen en roer totdat de agar volledig is opgelost. Als het begint te koken, roer gedurende een minuut en blijven dan haal van het vuur. Giet een laagje in uw petrischalen en bedek met deksels. Wikkel in aluminiumfolie en druk cook met uw graan (of gedurende ten minste 30 minuten op 15 psi). Verplaats uw petrischalen, paddenstoel weefsel en andere uitrusting naar de cleanroom. Laat de petrischaaltjes volledig afkoelen. Spray de cleanroom muren, bankjes en vloeren met 5% bleekwater oplossing (als schoon kleren voor slijtage, was uw handen enz). Een laminaire flow-bench en hepa-filter besmetting tijdens deze fase zou verminderen, maar het is mogelijk (met een hoger tarief van de verontreiniging) om te slagen zonder een.

Het nemen van de paddestoel door haar base, spuug zorgvuldig het doormidden. Plaats van de paddenstoel (buiten neer) op een schoon oppervlak, ervoor te zorgen dat je de binnenkant weefsel van het aanraken van iets. Het scalpel blad positie houden binnen de alcohol brander de vlam steriliseren. Open de klep van de petrischaal en koel het scalpel blad door het centraal plaatsen in uw agar. Met de scalpel, snij zorgvuldig een pleintje van het nieuw blootgestelde paddenstoel weefsel. Plaats het kwadraat van weefsel centraal in de agar en bedek met de petrischaal deksel. U kunt wensen om het deksel tape (met een schone ademend tape) ter vermindering van de kans op besmetting. Herhaal het proces, ervoor zorgend om de scalpel vóór elke overmaking te steriliseren. Laat de petrischaaltjes om te broeden.

Incubeer voor pleurotus ostreatus bij 24° C (75° F) en pleurotus pulmonarius (zomer) 24° C tot 30° C (75° F tot 85° F). Kolonisatie moet ongeveer 8 tot 10 dagen duren.

Gedurende deze tijd, petrischalen die lijkt te zijn besmet met andere mallen te verwijderen. Eenmaal volledig gekoloniseerd (mycelium nadert de randen), is het tijd om de agar overbrengen in de gesteriliseerde korrel. Kies alleen de meest gezonde culturen voor de inentingen. Steriliseren van het scalpel blad, en verwijder het deksel van de petrischaal en snijd 2 wiggen van het centrum van de schotel. Verwijder de aluminiumfolie en het deksel van de pot van het graan. Met behulp van de scalpel, overbrengen in de segmenten de steriele korrel. Snel, een kleine hoeveelheid watten doorzetten van het deksel ademhaling gat en hechten aan de pot. Ten slotte, schud de pot om krachtig te verspreiden het mycelium uit agar in de korrel. Plaats op een schaduwrijke plank binnen de cleanroom te broeden (temperaturen als hierboven). Herhaal voor elke jar van gesteriliseerde graan.

Opmerking: klonen herhaaldelijk (zonder invoering van nieuwe stammen) kan leiden tot repliceren vervagen, met latere culturen uiteindelijk verlies van vitaliteit en daarom produceren minder paddestoelen. In tegenstelling tot het klonen maken sporen wanneer ontkiemd (zie stap 8b), veel verschillende stammen die concurreren met elkaar. De resulterende paddestoel kenmerken variëren daarom van cultuur tot cultuur.